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        首頁 > 產品中心 > 產品  >  試劑  >  Prime-AQ100-100MLHEK293細胞轉染試劑

        HEK293細胞轉染試劑

        簡要描述:HEK293細胞轉染試劑,PEI Prime是以一種陽離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine,PEI)為載體的基因轉染試劑。

        • 產品型號:Prime-AQ100-100ML
        • 廠商性質:經銷商
        • 更新時間:2023-03-15
        • 訪  問  量:1106
        詳情介紹

        產品名稱:HEK293細胞轉染試劑

        產品簡介:
        PEI線性轉染試劑(PEI Prime Powder, Transfection Grade Linear Polyethylenimine):PEI Prime是以一種陽離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine,PEI)為載體的基因轉染試劑。PEI是在pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負電的DNA牢固結合,并賦予凈陽離子電荷,使DNA進入細胞。PEI Prime是一種高性能轉染試劑,利用PEI的特性旨在實現高產量,可重復性和可擴展的瞬時基因表達。


        應用范圍:

        PEI轉染試劑能夠高效率轉染多種細胞系,包括貼壁細胞和懸浮細胞。此外,PEI是用于HEK293和CHO懸浮細胞轉染的試劑。PEI轉染試劑是生產任何具有成本效益的生物制劑的合適選擇,包括重組蛋白,抗體和病毒。



        PEI線性轉染試劑產品優(yōu)勢:

        1. 低毒,高效

        2. 操作簡單,高性價比

        3. 可提供可靠、具有可重復性的轉染結果

        4. 適用于快速、高通量轉染流程


        轉染步驟:

        -以HEK293貼壁細胞為例,步驟如下:

        1. 細胞接種:細胞密度2-6 x106 cells/mL。

        2. 質粒的準備:在5%最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中,每106個細胞稀釋1.0 ug pDNA。

        3. PEI的準備:在5%最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中,每106個細胞稀釋3.0 ug PEI Prime,混勻。

        4. 通過快速,短暫渦旋或顛倒數次試管,將pDNA和PEI Prime溶液混合在一起。

        5. 使pDNA和PEI的混合物在室溫下靜置10分鐘。

        6. 一邊旋轉板,一邊將pDNA和PEI混合物逐漸滴加到細胞中。

        7. 于37℃ CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。




        轉染的優(yōu)化:

        為達到高轉染效率和低細胞毒性的理想結果,可以進行如下優(yōu)化:

        參數

        范圍

        PEI濃度

        3.50-6.50mg/(L final culture)

        DNA濃度

        0.75-1.5mg/(L final culture)

        PEI/DNA混勻時間

        5.0-15.0minutes


        與市場同類品牌的PEI轉染效率的對比:

        使用PEI Prime(PEI:DNA濃度比3:1)或某國外品牌PEI,用CMV-SEAP質粒轉染20ml 含HEK293懸浮細胞的培養(yǎng)物。 轉染后5天,使用磷酸酶報告染料和UV / Vis檢測SEAP表達水平。數據表示占某國外品牌PEI的SEAP表達水平的百分比。結果顯示我們的PEI Prime 的轉染效率比國外同類廠家高出40%。


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